人和動物細胞因子 ELISA試劑盒免費代測
Western蛋白印跡 熒光定量PCR技術服務
靈敏度 | ng/ml |
|---|---|
檢測范圍 | → ng/ml |
穩定性 | 在4℃條件下，產品保存6個月 |
準備試劑與收集標本
1. 10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。
2. 收集標本：血清、血漿（EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細胞培養上清液、組織勻漿等盡早檢測，2-8℃保存48小時；更長時間須冷凍（-20 ℃或-70 ℃）保存，避免反復凍融。
3. 標準品液配制：取8個1.5ml離心管，第一管加標本稀釋液900ul，第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在第一管中加入標準品溶液100ul置于漩渦混合器上混勻后用加樣器吸出500ul，移至第二管。
如此反復作對倍稀釋，從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。
4. 洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）。
檢測程序
1. 加樣：每孔各加入標準品或待測樣品100ul，將反應板充分混勻后置37℃40分鐘。
2. 洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次，向濾紙上印干。
3. 每孔加入蒸餾水和第一抗體工作液各50ul(空白除外)。將反應板充分混勻后置37℃20分鐘。
4. 洗板：同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃10分鐘。
6. 洗板：同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul，置37 ℃暗處反應15分鐘。
8. 每孔加入100ul終止液混勻。
9. 30分鐘內用酶標儀在450nm處測吸光值。
結果計算與判斷
1. 所有OD值建議減除空白值后再行計算。如空白OD低于0.1，也可以直接計算。
2. 以標準品濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，使用軟件作圖，畫出標準曲線。
3. 根據樣品OD值計算出相應含量即可。繪圖軟件可在本網站技術資訊下載或向本公司郵件索取。
注意事項
1. 以上標準孔及待測樣品均建議做復孔，每次測定應同時做標準曲線。
2. 洗滌過程很關鍵。洗滌不充分將導致精確度誤差及OD值錯誤地升高。
3. 檢測時所有試劑都要恢復到室溫。板條開封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。
4. 試劑盒使用超敏TMB溶液，若顯色過深會出現絮狀物，屬正常現象，不影響結果判讀。
5. 說明書中試劑盒組成為96T的量，48T的量應減半!
6. 本試劑盒宜置4oC冰箱保存。僅用于科研，不能用于臨床診斷!
